血清血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒 新品

基本信息‌

‌英文名称‌：Serum/Plasma TaqMan miRNA Reverse Transcription Kit
作用机制：采用茎环结构的特异性引物，将血清或血浆中的miRNA逆转录为cDNA；试剂盒含优化的反应缓冲液与逆转录酶，可实现miRNA的高效逆转录，适用于后续的TaqMan定量PCR检测。 

适用样本：人或动物血清、血浆样本中的miRNA逆转录，适用于疾病诊断、基因调控研究等实验。
产品概述
血清血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒是一款专门用于从血清或血浆样本中提取microRNA（miRNA）并反转录为cDNA的试剂盒，结合TaqMan探针技术可实现对miRNA的高灵敏定量检测。血清或血浆样本中的miRNA含量较低，且存在大量的蛋白、脂质等杂质，同时RNase活性较高，对miRNA的提取与反转录造成挑战。该试剂盒优化了miRNA提取与反转录体系，采用了高效的miRNA提取试剂与特异性反转录引物，可从血清或血浆样本中高效提取miRNA，并特异性地将miRNA反转录为cDNA。反转录得到的cDNA可直接用于TaqMan miRNA定量PCR检测，通过实时荧光定量PCR技术实现对miRNA初始表达量的准确测定。该试剂盒操作简便，检测灵敏度高、特异性强，适用于临床血清或血浆样本中miRNA的表达分析，为疾病的早期诊断、预后评估、疗效监测等提供了重要的技术手段。
产品特点
血清血浆专用：针对血清血浆样本中miRNA含量低、杂质多的特点优化，提取效率高。

反转录特异性强：采用茎环结构的miRNA特异性反转录引物，避免其他RNA的非特异性反转录。

灵敏度极高：可检测血清血浆中低至飞摩尔级的miRNA，适合微量miMarker检测。

定量准确：反转录产物与TaqMan miRNA定量PCR试剂盒兼容，定量结果准确可靠。

操作简便：一站式试剂盒，包含miRNA提取和反转录所需的所有试剂，实验流程简化。
操作步骤

一、样本准备

取1-5mL漱口水样本转移至15mL离心管中，12000rpm离心10分钟，弃上清，收集细胞沉淀。

二、细胞裂解

向离心管中加入200~400μL细胞裂解液，再加入15~20μL蛋白酶K溶液

涡旋震荡10秒充分混匀，将离心管放入75℃恒温震荡器中，900rpm恒温震荡裂解45分钟

裂解完成后短暂离心，将上清液转移至新的离心管中

三、DNA吸附

向裂解上清中加入等体积的结合缓冲液，轻轻颠倒混匀

将混合液全部转移至一次性吸附柱中，12000rpm离心30秒，弃收集管中的废液

向吸附柱中加入500μL漂洗液，12000rpm离心30秒，弃废液；重复此漂洗步骤1次

四、DNA洗脱

将吸附柱放回收集管，12000rpm离心2分钟，彻底去除残留漂洗液

将吸附柱转移至新的1.5mL离心管中，向吸附柱中心加入50~100μL洗脱缓冲液（可预热至65℃提升洗脱效率）

室温静置2分钟，12000rpm离心1分钟，离心管中的液体即为提取完成的基因组DNA

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使用建议

溶解与保存：建议以液体形式保存于-20℃，避免反复冻融。

反应条件：常规反应温度为37℃，灭活需50℃处理5分钟。

推荐用量：根据实验体系优化，通常每50μL反应体系添加0.1-1U。