Recombinant Human p27 KIP 1 新品

Recombinant Human p27 KIP 1

商品介绍：

别称：AA408329, AI843786, Cdki1b, CDKN 1B, CDKN 4, CDKN1B, CDKN4, CDN1B_HUMAN, Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1B, Cyclin dependent kinase inhibitor p27, Cyclin-dependent kinase inhibitor 1B, Cyclin-dependent kinase inhibitor 1B (p27, Kip1), Cyclin-dependent kinase inhibitor p27, Cyclin-dependent kinase inhibitor p27 Kip1, KIP 1, KIP1, MEN1B, MEN4, OTTHUMP00000195098, OTTHUMP00000195099, p27, p27 Kip1

标签：N-terminal His Tag

种属：Human

宿主：E.Coli

表达区间：1-198

分子量：21.7 kDa

应用：Western Blot, ELISA

性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

纯度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

商品概述：

人源重组p27 KIP1（Recombinant Human p27 KIP1）是一种在实验室中通过重组DNA技术表达的、与人体内天然p27蛋白结构一致的蛋白质。它由CDKN1B基因编码，是一种关键的细胞周期依赖性激酶抑制因子，主要通过与CDK2-cyclin E等复合物结合来抑制其活性，从而在G1期向S期转换的检查点处发挥“刹车”作用，负向调控细胞周期进程。研究表明，p27 KIP1在多种肿瘤中表达下调，其水平与肿瘤的恶性程度和预后密切相关，因此在肿瘤发生机制研究和药物开发中备受关注。

重组蛋白的制备流程：

重组蛋白的制备流程主要包括以下几个关键步骤：

1.基因获取：从生物体中提取目的基因，可通过PCR技术扩增特定DNA片段，也可以人工合成基因序列，确保所获取的基因能编码目标重组蛋白。

2.载体构建：将获取的目的基因与合适的载体连接，常见载体有质粒、噬菌体等。载体需具备复制原点、筛选标记等元件，使目的基因能在宿主细胞中稳定复制和表达。

3.宿主细胞转化：把构建好的重组载体导入宿主细胞，如大肠杆菌、酵母细胞或哺乳动物细胞等。转化方法有化学转化法、电穿孔法等。

4.筛选与鉴定：运用抗生素筛选、PCR鉴定、测序等方法，挑选出含有重组载体的阳性克隆细胞。

5.蛋白表达：优化培养条件，诱导阳性克隆细胞表达重组蛋白。根据宿主细胞类型和蛋白特性，调整温度、诱导剂浓度等参数。

6.蛋白纯化：采用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤等方法，从细胞裂解液或培养液中分离纯化重组蛋白。

7.质量检测：对纯化后的重组蛋白进行纯度、活性、分子量等检测，确保其符合质量要求。

公司正在出售的产品：

收到产品后的处理：

离心收集：重组蛋白通常以冻干粉形式提供。在运输过程中，粉末可能会粘附在管壁或管盖上。因此，在开盖前，务必先进行短暂离心（例如 10,000-12,000 rpm，30秒），将冻干粉收集于管底。

复溶操作

选择合适的溶剂：

仔细阅读产品说明书，严格按照推荐的溶剂和浓度进行复溶。

通常使用无菌的 PBS 缓冲液或低盐缓冲液（如 10 mM Tris, pH 8.0）。

切勿使用纯水，因为缺乏缓冲能力和合适的离子强度可能导致蛋白沉淀或失活。

轻柔混匀：

向冻干粉中加入推荐体积的溶剂，用移液器枪头轻轻吹打或缓慢上下颠倒混匀。

绝对禁止涡旋震荡，因为剧烈的剪切力会破坏蛋白质的空间结构，导致其变性失活。

如果蛋白难以溶解，可将其置于 4℃ 静置 2 小时以上或在水平摇床上低速摇晃。

达到推荐浓度：

初次复溶时，建议将蛋白浓度配制在说明书推荐的范围内（通常不低于 100 μg/mL），这有助于维持蛋白的稳定性。