Recombinant Human Proteasome 20S LMP7 新品

Recombinant Human Proteasome 20S LMP7

商品介绍：

别称：ALDD, D6S216, D6S216E, Large multifunctional peptidase 7, Large multifunctional protease 7, LMP 7, LMP7, Low molecular mass protein 7, Low molecular weight protein 7, Macropain subunit C13, MGC1491, Multicatalytic endopeptidase complex subunit C13, NKJO, OTTHUMP00000062981, Protease component C13, Proteasome (prosome macropain) subunit beta type 8, Proteasome (prosome, macropain) subunit, beta type

标签：N-terminal His Tag

种属：Human

宿主：E.Coli

表达区间：73-276

分子量：22.3 kDa

应用：Western Blot, ELISA

性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

纯度：Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

商品概述：

LMP7是免疫蛋白酶体（Immunoproteasome）的关键催化亚基，在结构上替代了组成型蛋白酶体中的β5亚基。它主要在干扰素-γ（IFN-γ）等炎症因子的刺激下被诱导表达。LMP7赋予免疫蛋白酶体更强的胰凝乳蛋白酶样（Chymotrypsin-like）水解活性，通过切割产生C端富含疏水性氨基酸的多肽，从而优化抗原肽的生成，使其更易于与MHC I类分子结合，增强CD8+ T细胞对病毒感染细胞或肿瘤细胞的识别与清除。此外，LMP7在降解氧化损伤蛋白方面也发挥重要作用

重组蛋白的制备流程：

重组蛋白的制备流程主要包括以下几个关键步骤：

1.基因获取：从生物体中提取目的基因，可通过PCR技术扩增特定DNA片段，也可以人工合成基因序列，确保所获取的基因能编码目标重组蛋白。

2.载体构建：将获取的目的基因与合适的载体连接，常见载体有质粒、噬菌体等。载体需具备复制原点、筛选标记等元件，使目的基因能在宿主细胞中稳定复制和表达。

3.宿主细胞转化：把构建好的重组载体导入宿主细胞，如大肠杆菌、酵母细胞或哺乳动物细胞等。转化方法有化学转化法、电穿孔法等。

4.筛选与鉴定：运用抗生素筛选、PCR鉴定、测序等方法，挑选出含有重组载体的阳性克隆细胞。

5.蛋白表达：优化培养条件，诱导阳性克隆细胞表达重组蛋白。根据宿主细胞类型和蛋白特性，调整温度、诱导剂浓度等参数。

6.蛋白纯化：采用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤等方法，从细胞裂解液或培养液中分离纯化重组蛋白。

7.质量检测：对纯化后的重组蛋白进行纯度、活性、分子量等检测，确保其符合质量要求。

公司正在出售的产品：

收到产品后的处理：

离心收集：重组蛋白通常以冻干粉形式提供。在运输过程中，粉末可能会粘附在管壁或管盖上。因此，在开盖前，务必先进行短暂离心（例如 10,000-12,000 rpm，30秒），将冻干粉收集于管底。

复溶操作

选择合适的溶剂：

仔细阅读产品说明书，严格按照推荐的溶剂和浓度进行复溶。

通常使用无菌的 PBS 缓冲液或低盐缓冲液（如 10 mM Tris, pH 8.0）。

切勿使用纯水，因为缺乏缓冲能力和合适的离子强度可能导致蛋白沉淀或失活。

轻柔混匀：

向冻干粉中加入推荐体积的溶剂，用移液器枪头轻轻吹打或缓慢上下颠倒混匀。

绝对禁止涡旋震荡，因为剧烈的剪切力会破坏蛋白质的空间结构，导致其变性失活。

如果蛋白难以溶解，可将其置于 4℃ 静置 2 小时以上或在水平摇床上低速摇晃。

达到推荐浓度：

初次复溶时，建议将蛋白浓度配制在说明书推荐的范围内（通常不低于 100 μg/mL），这有助于维持蛋白的稳定性。