Recombinant Human Pyruvate Dehydrogenase E1-alpha subunit 新品

产品概述：

此重组蛋白通常带有His等亲和标签，主要用于科学研究。它在细胞能量代谢中扮演着枢纽角色，作为E1亚基（由2个α亚基和2个β亚基组成的异四聚体），负责催化丙酮酸不可逆地脱羧，将其转化为乙酰辅酶A，从而连接糖酵解与三羧酸（TCA）循环，是细胞通过氧化磷酸化产生能量的关键步骤。该复合体位于线粒体基质中，其活性受到严格的调控。

 商品介绍：

产品名称：Recombinant Human Pyruvate Dehydrogenase E1-alpha subunit

种属：Human

宿主：E.Coli

表达区间：30-390

分子量：39.6 kDa

标签：N-terminal His Tag

性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

纯度：Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses

应用：Western Blot, ELISA

溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

别称：ODPA_HUMAN, PDH, PDHA, PDHA1, PDHCE1A, PDHE1 A type I, PDHE1-A type I, PHE1A, Pyruvate Dehydrogenase (lipoamide) alpha 1, Pyruvate dehydrogenase complex, E1 alpha polypeptide 1, Pyruvate Dehydrogenase E1 alpha, Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, somatic form, mitochondrial

核心应用：

重组蛋白技术是现代生物技术、医学研究和制药工业的基石，应用极为广泛。

生物制药

这是重组蛋白最核心和价值最高的应用领域。许多过去只能从人或动物体内提取、来源稀少且昂贵的药物，现在都可以通过重组技术大规模生产。例如：细胞因子：如促红素（治疗贫血）

干扰素（抗病毒、抗肿瘤）、白细胞介素等。

激素：如重组人胰岛素（治疗糖尿病）、人生长激素。

凝血因子：用于治疗血友病。

单克隆抗体：已成为肿瘤、自身免疫性疾病等领域最重要的治疗药物之一。

疫苗开发

重组蛋白疫苗是一种重要的疫苗类型。它通过基因工程在体外细胞中表达病毒的关键抗原蛋白（如新冠病毒的RBD蛋白），纯化后制成疫苗。这类疫苗不含活病毒，安全性高，

且抗原成分精确、纯度高。

科研与诊断

重组蛋白是生命科学研究中不可或缺的工具。

细胞培养：作为生长因子、细胞因子等添加剂，用于干细胞诱导、细胞分化等研究。

免疫学研究：作为抗原用于开发ELISA等免疫检测试剂盒，或用于产生抗体。

结构与功能研究：帮助科学家研究蛋白质的结构、功能以及细胞信号通路。

重组表达原理：

基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。

宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。

蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。

冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。

操作要点：

电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。

抗体选择：

一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。

二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。

显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于~13.4 kDa处。

内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。

公司正在出售的产品：

应用建议:

实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。

浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。

安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。