大鼠表皮角质形成细胞 新品

商品属性

细胞简介

大鼠表皮角质形成细胞分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角质形成细胞是一种能合成角质蛋白的上皮细胞，此类细胞为表皮的主体，由表皮深层始逐渐增殖、分化，并在成为角化的角质细胞中，细胞核与细胞器完全消失，细胞亦失去生理功能而脱落。未脱落部分对机体尚有保护作用，故不必在洗擦身体时用力搓擦，使其过早脱失。表皮角质形成细胞主要分布于表皮基底层，在上皮程序性死亡后，细胞产生角化并移向表皮。体外培养的表皮角化细胞容易导致终末分化，不能充分增殖。角质形成细胞最终产生角质蛋白，在其向角质细胞演变过程中，一般可以分为四层，即基底层、棘层、颗粒层以及角质层。有人把前三层或前二层称为生发层或马尔匹基层。此外，在某些部位，特别在掌跖部位，角质层下方还可见到透明层。
产品信息

产品名称 大鼠表皮角质形成细胞

组织来源 皮肤组织

种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的大鼠表皮角质形成层细胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠表皮角质形成细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠表皮角质形成细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
生物特征

核心特征：是表皮的核心功能细胞，通过复杂的分化过程形成角质层，为皮肤提供物理、化学和免疫屏障，同时参与皮肤的损伤修复和免疫调节。

形态结构：体外培养时，贴壁生长的细胞呈多边形或铺路石样，融合后可形成多层细胞结构，模拟体内表皮的分化过程。

分子标记：增殖细胞表达Ki-67、CK5、CK14，分化细胞表达CK1、CK10、兜甲蛋白、丝聚合蛋白，还可表达整合素（Integrin）参与细胞黏附。

功能特性：具有自我更新和分化的能力，在体外可通过调节培养条件诱导其向特定方向分化；可分泌细胞因子、生长因子和抗菌肽，参与皮肤的免疫防御和损伤修复；还可响应外界刺激（如紫外线、化学物质），启动相应的细胞信号通路。

核心功能

① 构成皮肤表皮主要结构，维持皮肤屏障完整性

② 合成角蛋白，参与表皮角化、角质层形成

③ 参与皮肤损伤修复、创面愈合与表皮再生

④ 调控皮肤炎症反应，参与外界理化刺激防御
实验室培养与操作指南

原代细胞分离方法

采用胶原酶-胰酶联合消化法：

将组织剪碎至1mm³大小

加入含0.1%Ⅰ型胶原酶和0.25%胰蛋白酶的消化液，37℃振荡消化60-90分钟

200目滤网过滤，去除未消化组织

1200rpm离心5分钟，弃上清液收集细胞沉淀

用PBS重悬细胞，接种至培养瓶

培养条件

培养基：专用细胞培养基（含10%胎牛血清、1%双抗、成脂诱导因子）

培养环境：37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱

包被处理：培养瓶需经多聚赖氨酸（0.1mg/ml）包被，增强细胞贴壁性

换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基

传代操作步骤

吸弃旧培养基，用PBS轻洗细胞层2次

加入0.25%胰蛋白酶，37℃消化1-3分钟，显微镜下观察细胞回缩变圆

加入等体积培养基终止消化，轻轻吹打细胞使其脱落

1000rpm离心5分钟，弃上清后用培养基重悬细胞

按1:2或1:3比例接种至新培养瓶

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