大鼠骨髓树突状细胞(成熟DC细胞) 新品

商品属性

细胞简介

大鼠骨髓树突状细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的；树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞，典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落，细胞大而形态不规则，表面皱褶多，亦可见少量短刺状突，胞内细胞器丰富并可见吞噬泡，具有较强的迁移能力，伴随有部分未完全诱导成的单核细胞，贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成，多数呈悬浮生长， 细胞呈圆形，细胞体积进一步增大，表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 )，伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志，主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，进而激活T淋巴细胞，诱导免疫应答，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节；未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力，但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答，不能激活T细胞的第二信号，可导致T细胞无能，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低，一般在30%以下。
产品信息

产品名称 大鼠骨髓树突状细胞(成熟DC细胞)

组织来源 骨髓

种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的大鼠骨髓成熟DC细胞采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠骨髓树突状细胞(成熟DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定、细胞形态：等综合鉴定，纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮

细胞形态：圆形，树突状

传代特性：属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠骨髓树突状细胞(成熟DC细胞)体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
生物特征

细胞组成：骨髓分化完成的成熟抗原呈递树突状细胞

形态结构：胞体大，表面大量树突状突起，半悬浮生长，形态不规则

分子标记：MHC-Ⅱ、CD80、CD86、CD11c 高表达阳性

功能特性：强效抗原呈递、激活 T 细胞、启动特异性免疫、免疫应答调控

核心功能

高效抗原提呈，激活 T、B 淋巴细胞启动特异性免疫

分泌免疫调控细胞因子，主导免疫应答方向

连接固有免疫与适应性免疫，强化机体防御

参与自身免疫病、慢性炎症及抗肿瘤免疫调控
实验室培养与操作指南

原代细胞分离方法

采用胶原酶-胰酶联合消化法：

将组织剪碎至1mm³大小

加入含0.1%Ⅰ型胶原酶和0.25%胰蛋白酶的消化液，37℃振荡消化60-90分钟

200目滤网过滤，去除未消化组织

1200rpm离心5分钟，弃上清液收集细胞沉淀

用PBS重悬细胞，接种至培养瓶

培养条件

培养基：专用细胞培养基（含10%胎牛血清、1%双抗、成脂诱导因子）

培养环境：37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱

包被处理：培养瓶需经多聚赖氨酸（0.1mg/ml）包被，增强细胞贴壁性

换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基

传代操作步骤

吸弃旧培养基，用PBS轻洗细胞层2次

加入0.25%胰蛋白酶，37℃消化1-3分钟，显微镜下观察细胞回缩变圆

加入等体积培养基终止消化，轻轻吹打细胞使其脱落

1000rpm离心5分钟，弃上清后用培养基重悬细胞

按1:2或1:3比例接种至新培养瓶

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