大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞) 新品

商品属性

细胞简介

大鼠骨髓树突状细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的；树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞，典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落，细胞大而形态不规则，表面皱褶多，亦可见少量短刺状突，胞内细胞器丰富并可见吞噬泡，具有较强的迁移能力，伴随有部分未完全诱导成的单核细胞，贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成，多数呈悬浮生长， 细胞呈圆形，细胞体积进一步增大，表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 )，伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志，主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，进而激活T淋巴细胞，诱导免疫应答，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节；未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力，但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答，不能激活T细胞的第二信号，可导致T细胞无能，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低，一般在30%以下。
产品信息

产品名称 大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

组织来源 骨髓

种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的大鼠骨髓未成熟DC细胞采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定、细胞形态：等综合鉴定，纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮

细胞形态：圆形、梭形、多角形，形态多样

传代特性：属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
生物特征

细胞组成：骨髓分化早期未成熟树突状细胞

形态结构：胞体偏小，突起短小稀少，圆形 / 类圆形，半贴壁为主

分子标记：CD11c 弱阳性，MHC-Ⅱ、CD80/CD86 低表达

功能特性：抗原摄取捕捉、外周组织巡逻、炎症刺激后成熟分化、免疫耐受维持

核心功能

强抗原摄取与加工能力，感知外周抗原信号

低免疫原性，参与免疫耐受维持、避免自身免疫

接受刺激后成熟迁移，启动后续特异性免疫反应

维持机体免疫平衡，调控过敏与自身免疫反应
原代细胞传代操作指南

传代时机判断

当细胞融合度达到70%-80%时进行传代，此时细胞活力最佳，避免过度融合导致接触抑制

若细胞生长缓慢或形态变差，可提前传代调整密度

具体操作步骤

预处理：提前预热培养基、胰蛋白酶和PBS，准备好无菌离心管、移液管等耗材

消化细胞：吸弃旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞表面1-2次，去除残留血清；加入适量胰蛋白酶（覆盖细胞表面即可），37℃孵育1-3分钟，期间在显微镜下观察，待细胞边缘收缩、变圆且开始脱落时终止消化

终止消化与收集：加入等量含血清的培养基中和胰蛋白酶，用移液管轻轻吹打培养瓶壁，使细胞完全脱落形成细胞悬液；将细胞悬液转移至离心管，以1000rpm离心5分钟

重悬与接种：弃上清，用预热的完全培养基重悬细胞，按1:2-1:3的比例接种至新的培养瓶，补充培养基后轻轻摇匀，放入培养箱继续培养

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